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甘蓝型油菜BnDGP1基因的克隆与表达分析

         

摘要

DGP1(DEEP GREEN PANICLE1)是植物的一种特异性蛋白,具有保守的TIGR01589结构域,在绿色组织中表达。为探究DGP1基因在甘蓝型油菜中的功能,本研究以甘蓝型油菜‘高油酸1号’为材料,克隆得到2个同源拷贝,长度为288 bp,编码95个氨基酸,分别命名BnDGP1-1和BnDGP1-2。生物信息学分析结果表明,BnDGP1-1、BnDGP1-2与拟南芥AT3G55240及水稻OsDGP1分子式相近,均为不稳定亲水性非跨膜蛋白,未找到信号肽结构,均属于非分泌蛋白;BnDGP1-1、BnDGP1-2的二级结构和三级结构相吻合。亚细胞定位结果表明,BnDGP1-1、BnDGP1-2均在细胞核中表达。实时荧光定量PCR分析表明,BnDGP1的5个同源拷贝除BnaA05G0066400ZS在花中相对表达最高,其他拷贝表达趋势没有明显差异,均为叶片>茎>角果皮>花的表达模式,而在根和花蕾中几乎不表达。本文构建了植物表达载体pCAMBIA1304-Bn-DGP1-1、pCAMBIA1304-BnDGP1-2以及CRISPR-cas9敲除载体。

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