腺病毒载体表达轮状病毒G1型外壳蛋白VP7及其诱导的免疫应答研究

谢力; 闫姗姗; 欧霞; 郭莉莉; 吴晋元; 周艳; 李鸿钧; 孙茂盛

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构建表达地方流行株轮状病毒G1型外壳蛋白VP7的复制缺陷型重组腺病毒,免疫小鼠评价其体液及细胞免疫反应效果,探讨基因工程轮状病毒疫苗的实验基础及可行性。RT-PCR扩增轮状病毒VP7基因并克隆至pshuttle-CMV穿梭质粒,pshuttle-VP7与腺病毒骨架质粒同源重组后转染293细胞包装重组腺病毒rAd-VP7。RT-PCR、western blot检测rAdVP7在体外细胞中的转录及表达。rAd-VP7经肌注或滴鼻免疫小鼠后检测其血清IgG、肠道IgA及中和抗体效价;流式、ELISPOT检测淋巴细胞亚群变化及IFN-γ分泌情况。结果显示ELISA可检测到免疫小鼠血清IgG和滴鼻组肠道IgA抗体的产生;肌注和滴鼻免疫组中和抗体平均滴度分别为228和322.5;免疫小鼠脾细胞IFN-γ的分泌增加。表达轮状病毒VP7的重组腺病毒不但能够激发体液及细胞免疫反应,滴鼻免疫途径还可诱导粘膜免疫应答。

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来源
《现代免疫学》 |2015年第2期|96-101|共6页
作者
谢力; 闫姗姗; 欧霞; 郭莉莉; 吴晋元; 周艳; 李鸿钧; 孙茂盛;
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作者单位

昆明学院医学院;

昆明650214;

中国医学科学院医学生物学研究所、北京协和医学院、云南省重大传染病疫苗研发重点实验室;

昆明650118;

昆明医科大学;

昆明650503;

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正文语种 chi
中图分类免疫分子生物学（免疫化学）;
关键词
轮状病毒; VP7; 重组腺病毒; 免疫原性;

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