绵羊肺腺瘤病毒pEGFP-C1/exJSRV-env构建及引起NIH3T3细胞恶性转化的研究

张宇飞; 刘月; 王专家; 孙晓林; 刘淑英

首页> 中文期刊> 《病毒学报》 >绵羊肺腺瘤病毒pEGFP-C1/exJSRV-env构建及引起NIH3T3细胞恶性转化的研究

绵羊肺腺瘤病毒pEGFP-C1/exJSRV-env构建及引起NIH3T3细胞恶性转化的研究

开具论文收录证明 >>

文献代查 >>

页面导航

摘要
著录项
相似文献
相关主题

摘要

为了构建绵羊肺腺瘤病毒囊膜基因真核表达质粒并观察绵羊肺腺瘤病毒囊膜蛋白在293T细胞中的定位情况以及探讨是否可诱导NIH3T3细胞发生恶性转化,本研究采用RT-PCR技术从自然感染绵羊肺腺瘤病的病羊肺组织中克隆完整的外源性绵羊肺腺瘤病毒囊膜基因(exJSRV-env),并将其亚克隆到真核表达载体pEGFP-C1中。构建好真核表达质粒经PCR、酶切和测序鉴定。同时对exJSRV-env基因进行生物信息学分析。采用脂质体法将该重组质粒转染293T细胞,观察其在真核细胞中的表达及定位情况。将该重组质粒转染NIH3T3细胞,观察细胞是否发生恶性转化。用软琼脂集落实验检查转染重组质粒的NIH3T3细胞的生长状态。结果显示真核表达质粒构建成功并命名为pEGFP-C1/exJSRV-env。exJSRV囊膜蛋白的氨基酸序列与参考株比对发现该囊膜基因的跨膜区(TM区)的胞质尾区具有外源性病毒特有的YXXM基序。系统进化树也表明我们克隆的exJSRV-env基因属于致病性的外源性病毒。运用生物信息学技术分析env基因编码的蛋白质的基本性质,并预测其可能的结构。亚细胞定位表明exJSRV囊膜蛋白主要分布于细胞膜。转染pEGFP-C1/exJSRV-env质粒的NIH3T3细胞接触抑制性消失,可在软琼脂中形成集落。说明绵羊肺腺瘤病毒的囊膜蛋白可引起NIH3T3细胞发生恶性转化。研究结果为进一步探讨exJSRV囊膜蛋白的结构和功能及其致病机理提供了实验基础。

著录项

来源
《病毒学报》 |2014年第3期|268-277|共10页
作者
张宇飞; 刘月; 王专家; 孙晓林; 刘淑英;
展开▼
作者单位

内蒙古农业大学兽医学院;

呼和浩特010018;

农业部动物临床诊疗技术重点实验室;

呼和浩特010018;

展开▼
原文格式 PDF
正文语种 chi
中图分类家畜病毒学;
关键词
外源性绵羊肺腺瘤病毒囊膜基因; 囊膜蛋白; 亚细胞定位; 细胞转化;

相似文献

中文文献
外文文献
专利

1. 绵羊肺腺瘤病毒囊膜蛋白引起绵羊绒毛膜滋养层细胞的恶性转化 [J] . 赵娟 ,徐斯日古楞 ,李慧萍 . 畜牧兽医学报 . 2018,第5期
2. 绵羊肺腺瘤病毒囊膜蛋白的表达可促进NIH3T3细胞增殖 [J] . 杜方原 ,陈大勇 ,张宇飞 . 细胞与分子免疫学杂志 . 2016,第9期
3. 绵羊肺腺瘤病毒囊膜蛋白及其TM亚基通过激活Akt诱导NIH 3T3细胞转化 [J] . 刘畅 ,李磊 ,于立新 . 中国预防兽医学报 . 2014,第8期
4. 绵羊肺腺瘤病毒人工感染羔羊淋巴细胞动态变化的研究 [J] . 么宏强 ,斯日古楞 ,马学恩 . 黑龙江畜牧兽医 . 2007,第12期
5. NK-lysin在人工感染绵羊肺腺瘤病毒肺组织的表达及其在不同品种绵羊的多态性分析 [J] . 徐金霞 ,宁志军 ,李莉 . 现代牧业 . 2018,第2)期
6. 绵羊肺腺瘤病毒ENV蛋白的亚细胞定位及转化细胞能力的研究 [C] . ZHANG Yu-fei ,张宇飞 ,WANG Zhuan-jia . 2013年中国畜牧兽医学会兽医病理学分会暨中国病理生理学会动物病理生理学专业委员会学术研讨会 . 2013
7. 绵羊肺腺瘤病毒囊膜蛋白引起体内外细胞转化的研究 [A] . 石晶 . 2016

绵羊肺腺瘤病毒pEGFP-C1/exJSRV-env构建及引起NIH3T3细胞恶性转化的研究

摘要

著录项

相似文献

相关主题

期刊订阅