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狗蔷薇细胞分裂素氧化酶基因RcCKX5的克隆及表达分析

         

摘要

利用RACE技术从狗蔷薇(Rosa canina)类根体中克隆得到1个细胞分裂素氧化酶基因cDNA全长,命名为RcCKX5。序列分析表明,RcCKX5 cDNA全长1 815 bp,5′UTR 104 bp,ORF 1 626 bp,3′UTR85 bp,编码541个氨基酸,具有CKX家族典型的FAD(黄素腺嘌呤二核苷酸)结合域和CK(细胞分裂素)结合域。氨基酸序列多重比对和系统进化树分析显示RcCKX5与可可TcCKX5亲缘关系最近,与拟南芥AtCKX5、乌拉尔图小麦TuCKX5同源性较高。荧光定量PCR分析表明,狗蔷薇RcCKX5在其根、茎、叶、花、果实中均有表达,根中相对表达量最高,花和果实中相对表达量较高。在狗蔷薇类根体形成发育过程中RcCKX5的相对表达量不断升高,21 d时达到最高,随后稍有下降,表明其可能参与了类根体的形成。6-BA处理结果表明RcCKX5能够快速响应6-BA的诱导,表达量显著上调,2.5 mg·L-1 6-BA处理120 h时,RcCKX5的相对表达量达到最高峰。

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