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鼠伤寒沙门菌sRNA GcvB与靶基因的作用机理分析

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为深入了解鼠伤寒沙门菌sRNA GcvB与靶基因的结合位点,在此前报道的鼠伤寒沙门菌GcvB调控基因基础上,本试验首先通过对部分显著调控基因进行荧光定量PCR引物的设计与合成,然后利用无痕基因重组技术分别构建鼠伤寒沙门菌gcvB基因R1、R2和R3功能基序缺失菌株,最后通过荧光定量PCR技术检测各基因在鼠伤寒沙门菌野生型菌株、gcvB基因缺失株、gcvB R1基因缺失株、gcvB R2基因缺失株和gcvB R3基因缺失株中对数期转录水平变化。PCR扩增及测序结果显示,gcvB基因R1、R2和R3基序已被分别敲除且未留下冗余序列。荧光定量PCR检测结果显示,fhuA、aphA、STM2714、STM0298和STM1827基因在gcvB、gcvB R1、gcvB R2或gcvB R3单敲除时转录水平均显著下调,STM0276、exbD和sodA基因在gcvB、gcvB R1或gcvB R2单敲除时转录水平均显著下调,trpE和yifK基因则在gcvB或gcvB R3单敲除时转录水平均显著上调。以上结果表明,GcvB正调控fhuA、aphA、STM2714、STM0298和STM1827基因可能与R1、R2或R3基序相关,正调控STM0276、exbD和sodA基因可能与R1或R2基序相关,负调控trpE和yifK基因与R3基序有关。

著录项

来源
《中国兽医学报》 |2021年第7期|1321-1327|共8页
作者
潘永; 杨阳; 段世宇; 杨琦;
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作者单位

贵州大学动物科学学院;

贵州贵阳550025;

贵州大学动物疫病研究所;

贵州贵阳550025;

贵州省动物疫病与兽医公共卫生重点实验室;

贵州贵阳550025;

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原文格式 PDF
正文语种 chi
中图分类病原细菌;人畜共患病;
关键词
鼠伤寒沙门菌; 小RNA; 无痕基因重组; 荧光定量PCR;

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