温度对大肠埃希菌Mn-SOD基因启动子调控条件的优化

邵海刚; 侯亚文; 张莹; 刘奕彦; 许海峰; 张洪勤; 应俊

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温度对大肠埃希菌Mn-SOD基因启动子调控条件的优化

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目的构建大肠埃希菌BL21 Mn-SOD-RFP报告基因载体,并探讨温度对大肠埃希菌Mn-SOD基因启动子的调控。方法利用重组PCR技术,构建以Mn-SOD启动子调控的红色荧光蛋白(RFP)报告基因载体,将融合基因与T载体连接导入大肠埃希菌中,在不同温度(20、37、40和45℃)培养不同时间(13、20、30、37、44和54 h)后,利用荧光显微镜和荧光光度计观察大肠埃希菌表达RFP的情况。结果正确构建Mn-SOD-RFP融合基因,重组PCR结果与测序结果完全一致;不同温度不同时间诱导后,Mn-SOD启动子在37℃,培养30～37 h表达的红色荧光蛋白最多。结论成功构建该报告基因载体,并完成温度、时间对其调控的优化,为更进一步研究其他因素对SOD基因启动子的调控机制奠定基础。

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来源
《中国微生态学杂志》 |2012年第10期|886-888|共4页
作者
邵海刚; 侯亚文; 张莹; 刘奕彦; 许海峰; 张洪勤; 应俊;
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作者单位

温州医学院检验医学院与生命科学学院;

浙江温州325035;

温州医学院生物学实验教学中心;

浙江温州325035;

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原文格式 PDF
正文语种 chi
中图分类基因工程（遗传工程）;
关键词
超氧化物歧化酶; 启动子; 重组PCR; 红色荧光蛋白; 报告基因; 温度;

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