淋菌孔蛋白PorB原核表达与抗原表位及保守性分析

骆诗露; 黄健; 韩道宾; 陈昱希; 朱杰华; 陈泽慧; 闵迅

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目的构建淋菌PorB原核表达载体以制备PorB重组蛋白,并分析其B淋巴细胞抗原表位及在不同血清型淋菌菌株中的保守性,以评价其作为淋菌候选蛋白疫苗的可行性。方法以淋菌标准菌株基因组DNA为模板,利用PCR技术扩增出PorB基因,并构建原核表达载体ppSUMO-PorB,酶切鉴定成功后转化至大肠埃希菌BL21（DE3）,经IPTG诱导后行SDS-PAGE,检测蛋白表达情况;从Genebank中找出不同淋菌血清型的PorB蛋白质氨基酸序列,并用ClustalX 2.1软件分析其序列保守性,DNASTAR软件预测其B淋巴细胞抗原表位。结果大肠埃希菌BL21（DE3）有PorB蛋白表达,并以包涵体表达形式存在;PorB蛋白在不同血清型淋菌菌株间具有较高的保守性（达95.7%）,PorB蛋白的B淋巴细胞抗原表位主要位于152～157、166～179、201～216、246～253、260～267、295～303、311～318等氨基酸区段。结论成功构建ppSUMO-PorB原核表达载体,并在原核系统中得到了包涵体形式的PorB蛋白,且该蛋白保守性高,可以作为淋菌蛋白疫苗候选靶点。

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来源
《中华医院感染学杂志》 |2016年第10期|2190-2192|共4页
作者
骆诗露; 黄健; 韩道宾; 陈昱希; 朱杰华; 陈泽慧; 闵迅;
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作者单位

遵义医学院医学检验系;

贵州遵义563003;

遵义医学院附属医院检验科;

贵州遵义563003;

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原文格式 PDF
正文语种 chi
中图分类微生物学检验;
关键词
淋菌; PorB蛋白; 原核表达; 保守性;

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