Tec家族蛋白酪氨酸激酶ItkPH结构域的克隆鉴定及其在酵母双杂交系统中自激活作用的检测

韩月恒; 张晓光; 杨敏; 聂小燕; 刘新平; 白玉杰; 苏成芝; 药立波

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Tec家族蛋白酪氨酸激酶Itk特异地表达于T细胞 ,对T细胞的成熟与活化等具有很大影响 ,因而可能在T细胞的信号转导过程中处于重要位置。我们利用PCR的方法从含Itk基因全长cDNA的pME18S EMT质粒中扩增出其PH结构域基因片段 ,并将其克隆入酵母双杂交载体pLexA ,经测序鉴定正确 ,转化酵母细胞EGY48（p8op lacZ ） ,挑取阳性克隆 ,利用液相法和平板法检测 ,证实PH结构域无自激活作用 ,且对宿主菌无毒性作用 ,可用于T细胞cDNA文库的筛选 ,捕捉与之相互作用的蛋白。

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来源
《现代免疫学》 |2000年第2期|88-91|共4页
作者
韩月恒; 张晓光; 杨敏; 聂小燕; 刘新平; 白玉杰; 苏成芝; 药立波;
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作者单位

第四军医大学生物化学与分子生物学教研室!西安710032;

第四军医大学生物化学与分子生物学教研室!西安710032;

第四军医大学生物化学与分子生物学教研室!西安710032;

第四军医大学生物化学与分子生物学教研室!西安710032;

第四军医大学生物化学与分子生物学教研室!西安710032;

第四?;

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正文语种 chi
中图分类免疫分子生物学（免疫化学）;
关键词
Itk; PH结构域; 酵母双杂交系统; 自激活作用;

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