重组寻常型天疱疮抗原抗血清的制备与纯化

潘萌; 郑捷; 李卫平; 薛峰; 黄冬生

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重组寻常型天疱疮抗原抗血清的制备与纯化

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寻常型天疱疮抗原（pemphigusvulgarisantigen ,PVA ）是桥粒中相对分子质量为 130 0 0 0的糖蛋白 ,其分子由细胞外区（extracellulardomain ,EC ）、跨膜区和细胞内区三部分组成 ,主要发挥作用的区域在细胞外区。为了了解PVA细胞外区的致病性位点及其相应抗体的致病作用 ,制备抗血清是必需环节。本文在已重组表达的PVAEC1 2融合蛋白的基础上进行蛋白纯化 ,并免疫家兔 ,使之产生针对融合蛋白的特异性抗血清 ,经双向免疫扩散实验 ,其效价为 1:16～ 1:32。采用辛酸沉淀法和DEAE 5 2 纤维素阴离子交换层析进行抗血清IgG抗体成分的提纯 ,总量为 12 5～ 2 2 0mg ,经间接免疫荧光检测 ,其滴度为 1:40。从而获得高滴度、高特异性的兔抗PVAEC1 2融合蛋白抗血清IgG抗体成分。

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来源
《现代免疫学》 |2002年第1期|16-1822|共3页
作者
潘萌; 郑捷; 李卫平; 薛峰; 黄冬生;
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作者单位

上海第二医科大学附属瑞金医院皮肤科;

上海第二医科大学附属瑞金医院皮肤科;

上海第二医科大学附属瑞金医院皮肤科;

上海第二医科大学附属瑞金医院皮肤科;

上海第二医科大学医学检验重点实验室上海200025;

上海200025;

上海200025;

上海200025;

上海200023;

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原文格式 PDF
正文语种 chi
中图分类免疫学技术、设备及实验方法;
关键词
兔抗血清; IgG抗体成分; 纯化;

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