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HCV NS3解旋酶基因原核表达载体pGEX-4T-1的构建

         

摘要

[目的]构建丙型肝炎病毒(HCV)非结构蛋白NS3解旋酶基因原核表达载体,为进一步研究和解析NS3的解旋酶基因对病毒复制的机制准备条件。[方法]将含有NS3基因的pMD-24/HCVNS3质粒转化感受态菌DH-5α并扩增;提取pMD-24/HCVNS3质粒;从pMD-24/HCVNS3质粒中扩增出NS3解旋酶基因;并将其插入到克隆载体pMD-18T中,再与表达载体pGEX-4T-1重组,以得到重组的原核表达载体pGEX-4T-1/NS3解旋酶。[结果]从pMD-24/HCVNS3质粒中扩增出的NS3解旋酶基因片断大小正确,经测序证明其碱基序列为编码目的基因的正确序列;电泳结果证明已将此片段克隆到pGEX-4T-1内。[结论]成功地构建了HCVNS3解旋酶基因的原核表达载体pGEX-4T-1/NS3解旋酶。

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