猪NLRP3单克隆抗体制备及其抗原表位的鉴定

刘博; 霍芳; 徐晴晴; 刘海隆; 张莹; 蔡青云; 谷英华; 张艳; 王文秀

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猪NLRP3单克隆抗体制备及其抗原表位的鉴定

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为制备猪炎症小体NLRP3的特异性单克隆抗体(monoclonal antibodies,MAb),本研究将原核表达的可溶性重组蛋白NLRP3作为免疫原免疫BALB/c小鼠,经融合、筛选获得了3株能稳定分泌NLRP3蛋白的杂交瘤细胞株9H5、13E1、15E2,鉴定了抗体亚类,将目的蛋白逐步截短后鉴定出了单克隆抗体识别的抗原表位区域。结果表明,MAb 9H5和15E2识别的抗原表位序列在1~57 aa之间,MAb 13E1识别的表位序列在115~186 aa之间。免疫荧光、Western blot和亚类鉴定试验显示,杂交瘤细胞产生的抗体均可与NLRP3及重组蛋白特异性结合,9H5、13E1、15E2的重链亚型均为IgG 2b,轻链分别为λ、λ和κ链。本研究成功制备了猪NLRP3的单克隆抗体,为进一步研究猪炎症小体NLRP3的功能提供工具。

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来源
《中国兽医学报》 |2022年第11期|2211-2215|共6页
作者
刘博; 霍芳; 徐晴晴; 刘海隆; 张莹; 蔡青云; 谷英华; 张艳; 王文秀;
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作者单位

山东省滨州畜牧兽医研究院;

山东滨州256600;

山东省院士工作站;

山东滨州256600;

山东绿都生物科技有限公司;

山东滨州256600;

海南省家畜家禽工程技术研究中心;

海南海口571100;

滨州市人民医院;

山东滨州256600;

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原文格式 PDF
正文语种 chi
中图分类家畜病毒学;
关键词
猪NLRP3; 单克隆抗体; 抗原表位鉴定;

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