荧光定量PCR技术检测疟原虫方法初探

邵雷; 朱姗姗; 胡文佳; 蒋昵真; 陈妍; 林红

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荧光定量PCR技术检测疟原虫方法初探

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目的探索荧光定量PCR技术在献血者疟原虫检测中的应用。方法参照文献设计针对疟原虫18S小亚基核糖体RNA (18S rRNA)基因序列的通用引物和探针并构建标准质粒;将标准质粒和4种疟原虫阳性标本进行梯度倍比稀释后进行荧光定量PCR检测,建立符合本实验室条件的实验体系,与巢式PCR方法进行灵敏度比较,并对47例献血者进行疟原虫筛查。结果应用荧光定量PCR技术检测标准质粒的检测下限是10-1copy/μL,用于恶性疟原虫(Plasmodium falciparum)、间日疟原虫(P.vivax)、三日疟原虫(P.malaria)和卵形疟原虫(P.ovale)阳性标本检测,其下限均为1 copy/μL,且整个PCR程序仅用时1 h 59 min;应用荧光定量PCR技术检测47例献血者全血标本,均为阴性;应用巢式PCR技术检测间日疟原虫和三日疟原虫的检测下限为102copy/μL,检测灵敏度明显低于荧光定量PCR检测方法。结论荧光定量PCR检测方法具有操作简单、快速、灵敏、经济等特点,通过针对本实验室的特定实验优化,更加适用于献血者疟原虫的快速大量筛查。

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来源
《中国输血杂志》 |2020年第11期|1144-1147|共4页
作者
邵雷; 朱姗姗; 胡文佳; 蒋昵真; 陈妍; 林红;
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作者单位

江苏省血液中心;

江苏南京210042;

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原文格式 PDF
正文语种 chi
中图分类输血疗法;
关键词
疟原虫; 荧光定量PCR; 18S核糖体RNA; 巢式PCR; 献血者;

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