RhD mRNA剪接体实时荧光定量方法的建立

梁延连; 苏宇清; 吴凡; 徐华; 周华友; 张印则

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RhD mRNA剪接体实时荧光定量方法的建立

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目的建立RhD mRNA剪接体实时荧光定量技术,了解不同个体中RhD mRNA剪接体的含量与表达水平。方法制备本实验室SYBR Green荧光染料定量检测RhD mRNA剪接体的标准曲线,设计RhD mRNA剪接体的引物,提取随机选择的150例血液样品中的mRNA,反转录为c DNA,并以c DNA为模板进行PCR扩增,扩增时加入荧光基团,利用荧光信号实时监控整个PCR进程,最后通过标准曲线来计算RhD mRNA各剪接体的表达量。结果根据荧光定量的峰值读数,以2nd Derivative Max计算方法,计算出所测样本的理论值、实测值,两个重复孔的平均值作为所检测样本RhD mRNA剪接体的表达量。结论此方法可以准确定量不同个体RhD mRNA剪接体的拷贝数,为RHD血型基因的研究与抗原表达的研究提供依据。

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来源
《中国输血杂志》 |2017年第10期|1126-1128|共3页
作者
梁延连; 苏宇清; 吴凡; 徐华; 周华友; 张印则;
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作者单位

深圳市血液中心;

广东深圳518035;

陕西省血液中心;

南方医科大学南方医院;

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原文格式 PDF
正文语种 chi
中图分类 R457.11;
关键词
Rh; mRNA; 荧光定量; 标准曲线; 剪接体;

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