猪圆环病毒Ⅱ型感染性DNA克隆的构建

谢俊岭; 邵小雪; 孟凡伟; 周双海

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猪圆环病毒Ⅱ型感染性DNA克隆的构建

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为了构建猪圆环病毒Ⅱ型(PCV2)感染性DNA克隆,并为PCV2的突变体构建及其致病机理研究建立基础。用PCR方法从PCV2 DNA质粒中扩增出PCV2全基因组片段,将其插入到pBluescript-SK载体中,构建出单拷贝PCV2 DNA克隆,并进一步构建了双拷贝PCV2 DNA克隆,将PCV2 DNA克隆转染PK-15细胞,以获得PCV2拯救病毒,并初步测定了拯救病毒的体外增殖能力。结果显示:成功获得了PCV2拯救病毒,并能够在PK-15细胞中进行稳定传代,其TCID50在连传5代后达到10-6.05/mL,与其亲本病毒相近,显示出较高的感染滴度。研究结果表明,成功构建了具有较高感染性的PCV2感染性克隆,为PCV2的生物学特性及致病机理研究奠定了基础。

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来源
《中国农学通报》 |2012年第32期|84-88|共5页
作者
谢俊岭; 邵小雪; 孟凡伟; 周双海;
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作者单位

北京农学院动物科学技术学院;

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原文格式 PDF
正文语种 chi
中图分类病毒病;
关键词
猪圆环病毒Ⅱ型; 感染性DNA克隆; 拯救病毒; 增殖能力;

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