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猪圆环病毒1型感染性克隆的构建与病毒拯救

         

摘要

用PCR法扩增猪圆环病毒1型(PCV1)全长基因组,将2个基因组顺式连接插入到pUC19质粒载体中构建感染性分子克隆.通过引物设计替换碱基,在病毒基因组内插入Sal Ⅰ酶切位点作为分子靶标,拯救出带有分子标记的克隆病毒,命名为recPCV1/G株.通过免疫过氧化物酶单层细胞试验(IPMA)在病毒感染细胞中检出病毒抗原,其抗原性仅与PCV1/Cap蛋白单价特异性抗体发生反应,而与抗PCV2/Cap蛋白抗体无交叉.克隆毒株基因组内插入一个Aal Ⅰ酶切位点,可用PCR结合限制性片段长度多态性分析法(PCR-RFLP)与亲本病毒相鉴别.该毒株经细胞连续传10代,体外培养增殖性能稳定,病毒滴度达104.8TCID50/mL.构建的PCV1感染性克隆,为今后开展该病毒的起源与演化、遗传变异规律、分子鉴别诊断等研究奠定了基础.

著录项

  • 来源
    《中国预防兽医学报》 |2008年第3期|161-165|共5页
  • 作者单位

    中国农业科学院哈尔滨兽医研究所,兽医生物技术国家重点实验室/猪传染病研究室,黑龙江,哈尔滨,150001;

    中国农业科学院哈尔滨兽医研究所,兽医生物技术国家重点实验室/猪传染病研究室,黑龙江,哈尔滨,150001;

    中国农业科学院哈尔滨兽医研究所,兽医生物技术国家重点实验室/猪传染病研究室,黑龙江,哈尔滨,150001;

    中国农业科学院哈尔滨兽医研究所,兽医生物技术国家重点实验室/猪传染病研究室,黑龙江,哈尔滨,150001;

    中国农业科学院哈尔滨兽医研究所,兽医生物技术国家重点实验室/猪传染病研究室,黑龙江,哈尔滨,150001;

    中国农业科学院哈尔滨兽医研究所,兽医生物技术国家重点实验室/猪传染病研究室,黑龙江,哈尔滨,150001;

  • 原文格式 PDF
  • 正文语种 chi
  • 中图分类 家畜病毒学;
  • 关键词

    猪圆环病毒1型; 感染性克隆; 病毒拯救;

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