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联合应用bcr-abl融合基因反义寡核苷酸与c-myb基因反义寡核苷酸对K562细胞作用的研究

         

摘要

目的 :研究联合应用bcr abl融合基因硫代磷酸反义寡核苷酸 (Aspo)及c myb基因Aspo对K5 6 2细胞作用效果。 方法 :Aspo与K5 6 2细胞共培养后 ,台盼蓝拒染法计死活细胞数 ;甲基纤维素半固体培养法培养CFU K5 6 2 ;流式细胞仪测定细胞P2 10蛋白表达及细胞凋亡率 ;RT PCR半定量检测细胞bcr ablmRNA ;电镜观察凋亡细胞形态学改变。结果 :倒置显微镜下观察到联合应用两种Aspo时 ,浓度各为 5 μmol/L组K5 6 2细胞仍呈克隆状生长 ,作用 2 4h细胞P2 10蛋白表达明显受抑制 ,表达率 <2 % ;作用 12 0h细胞生长抑制率为 6 1.7% ,P2 10恢复为 2 5 .7% ,凋亡率为 2 2 .5 %。两种浓度各为 10 μmol/L组K5 6 2细胞生长疏散 ,作用 12 0h细胞生长抑制率达 92 .2 % ,P2 10仍未恢复 ,凋亡率为 6 4.3% ,电镜下见细胞呈典型凋亡形态学改变。当两种Aspo浓度各为 5 μmol/L及 10 μmol/L作用 48h时 ,K5 6 2细胞bcr ablmRNA较空白组下降 6 9.2 %~85 3%。结论 :联合应用bcr abl基因Aspo及c myb基因Aspo对K5 6 2细胞的抑制作用具有一定的协同性 ,可增强其抗白血病效果。

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