黄瓜单链DNA结合蛋白基因CsWHY1的克隆及表达分析

袁高雅; 沈佳; 赵宇; 王星; 张璐; 李季; 陈劲枫

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黄瓜单链DNA结合蛋白基因CsWHY1的克隆及表达分析

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[目的]单链DNA结合蛋白Whirly(WHY)是植物体内广泛存在的一类转录因子,在植物叶片衰老等方面具有重要作用。本文旨在克隆黄瓜单链DNA结合蛋白基因CsWHY1,初步分析其表达特征,为黄瓜叶片衰老的功能研究提供参考。[方法]以华北型黄瓜‘9930’‘长春密刺’和‘新泰密刺’为试验材料,克隆CsWHY1的c DNA全长,应用生物信息学方法对该基因进行生物信息学分析,并利用洋葱表皮细胞瞬时表达系统对CsWHY1蛋白进行亚细胞定位,同时通过RT-qPCR技术分析CsWHY1基因在3个黄瓜品种不同组织中的表达模式。[结果]CsWHY1基因包含1个长度为831 bp的开放阅读框(ORF),共编码276个氨基酸,蛋白理论相对分子质量为30.729×10~3,理论等电点(p I)为9.00,属于亲水蛋白。氨基酸序列分析表明,CsWHY1蛋白具有保守的Whirly结构域,在双子叶植物和单子叶植物中高度同源,且与甜瓜亲缘关系最近。亚细胞定位发现CsWHY1蛋白在洋葱表皮的质体上表达。荧光定量PCR分析其表达模式,发现CsWHY1在不同黄瓜品种不同组织中均有表达,叶片中表达量最高,根和茎中表达量较低,其中衰老叶片中的表达量显著高于成熟叶片。[结论]CsWHY1基因的表达具有组织特异性,在衰老叶片高表达,参与了黄瓜叶片衰老进程。

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来源
《南京农业大学学报》 |2019年第2期|246-252|共7页
作者
袁高雅; 沈佳; 赵宇; 王星; 张璐; 李季; 陈劲枫;
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作者单位

南京农业大学园艺学院/作物遗传与种质创新国家重点实验室;

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正文语种 chi
中图分类黄瓜;
关键词
黄瓜; CsWHY1基因; 叶片衰老; 基因克隆; 表达分析;

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