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糖调节蛋白78抗四氯化碳诱导的人肝癌HepG2细胞脂肪合成

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为研究糖调节蛋白78(glucose regulated protein 78,GRP78)对肝细胞脂肪变性的影响,采用四氯化碳(carbon tetrachloride,CCl4)刺激人肝癌HepG2细胞,油红O染色证实,CCl4作用HepG2细胞后,细胞浆中脂肪颗粒明显增加,同时固醇调节元件结合蛋白1(sterol regulatory element bindingprotein 1,SREBP-1)蛋白水平和3羟3甲基戊二酸单酰CoA还原酶(HMGCoA还原酶)mRNA水平分别为对照组的1.55倍和1.70倍.构建人GRP78启动子荧光素酶报告基因载体pGL3/hGRP78P转染人肝癌HepG2细胞后,结果发现,CCl4促进GRP78基因转录,转录活性为诱导前的1.92倍.构建人GRP78 RNAi沉默质粒pSuper/GRP78转染人肝癌HepG2细胞后,该质粒能特异性沉默内源性GRP78;内源性GRP78沉默后的人肝癌HepG2细胞经CCl4诱导,HMGCoA还原酶mRNA和SREBP-1蛋白的表达较对照组进一步升高,分别为对照组的1.48倍和2.38倍;人肝癌HepG2细胞GRP78的体外过表达能降低CCl4介导的HMGCoA还原酶mRNA和SREBP-1蛋白诱导表达,分别为对照组的78.5%和51.5%;油红O染色进一步证实,GRP78过表达可明显减少脂肪颗粒在HepG2细胞浆中的集聚.综上表明,GRP78可抑制CCl4的SREBP-1和HMGCoA还原酶的诱导表达以及HepG2细胞脂肪变性,提示GRP78的表达增加在肝细胞脂肪变性损伤过程中具有潜在的保护作用.

著录项

来源
《中国生物化学与分子生物学报》 |2008年第6期|556-562|共7页
作者
吴逸园; 张立娟; 朱蓉; 陈素青; 李晓雯; 杨晓达; 李载权;
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作者单位

北京大学基础医学院生物化学与分子生物学系;

北京大学中国药物依赖性研究所;

北京大学药学院化学生物学系;

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正文语种 chi
中图分类脂肪代谢;脂肪代谢;
关键词
糖调节蛋白78; 固醇调节元件结合蛋白1; 内质网应激; 脂肪肝;

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