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下调paxillin高表达对结直肠癌细胞SW480细胞信号转导及超微结构的影响

         

摘要

目的:探讨下调paxillin高表达对结直肠癌细胞SW480细胞信号转导及超微结构的影响.方法:设计两种siRNA片段并用其转染高表达paxillin的结直肠癌细胞SW480细胞系,以空质粒作为阴性对照,构建稳定转染细胞系.NC组为转染空质粒的细胞系,SW545组是稳定转染针对paxillin545-565靶基因位点的siRNA片段的细胞系,SW782组是稳定转染针对paxillin782-802靶基因位点的siRNA片段的细胞系.Western blot检测SW480、NC、SW545及SW7824组细胞系中paxillin、FAK、ERK1/2及AKT1/2/3的表达及特异位点磷酸化水平.利用培养细胞制备切片,透射电镜下观察几组细胞系的超微结构.结果:SW545细胞paxillin的高表达无明显改变,SW782细胞paxillin的高表达被显著下调,SW782细胞paxillin(Tyr118)磷酸化水平也显著降低.SW782细胞ERK1/2的表达水平无明显变化,但是ERK1/2(Thr202/Tyr204)磷酸化水平显著降低.SW782细胞AKT1/2/3及FAK的表达及特异位点磷酸化水平均无明显变化.与SW480细胞相比,NC组细胞无明显超微结构改变,但是SW782细胞却发生了显著的超微结构变化,具有明显增多的微绒毛、微丝微管束与溶酶体以及明显减少的线粒体.结论:下调paxillin高表达能够逆转SW480细胞典型的恶性转化细胞的超微结构特征,paxillin高表达可能通过磷酸化激活paxillin及ERK1/2信号转导通路从而在结直肠癌发生发展中起着非常重要的作用.

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