动物细胞双顺反子高效稳定表达系统建立

黄立强; 孙奋勇; 林珊莉; 吴翠玲

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建立稳定高效的动物细胞表达系统对于许多重组蛋白质药物的工业化生产有着十分重大的意义。用PCR扩增得到dhfr基因 ,克隆入载体pIRESneo3基因以替换原有的neor 基因 ,并将hbFGF作为报告基因插入其多克隆位点 ,得到重组子pIRESdhfr hbFGF ,转导CHO细胞后 ,MTX浓度梯度筛选稳定表达hbFGF的细胞株 ,ELISA与WesternBlot检测培养基中hbFGF的分泌表达。结果发现 1 0、1 0 0、1 0 0 0nmol LMTX组均检测到hbFGF的表达 ,其中表达量最高的一株细胞传代 2 0次后表达量仍能维持较高的水平。

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来源
《中国生物工程杂志》 |2004年第10期|52-55|共4页
作者
黄立强; 孙奋勇; 林珊莉; 吴翠玲;
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作者单位

广州生物工程中心;

暨南大学生物工程研究所;

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原文格式 PDF
正文语种 chi
中图分类基因的表达;细胞、组织培养技术;
关键词
FGF; 稳定表达; IRES; 基因; 转导; MTX; 细胞株; 动物细胞; 表达系统; 重组蛋白质;

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