根癌农杆菌介导的巴西橡胶树胚性悬浮细胞的遗传转化

于波; 吴华玲; 黄天带; 戴雪梅

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根癌农杆菌介导的巴西橡胶树胚性悬浮细胞的遗传转化

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为了建立橡胶树胚性悬浮细胞遗传转化体系,用根癌农杆菌EHA105(携带pCAMBIA1301,含有gusA和hptⅡ)侵染胚性悬浮细胞团,用GUS检测的方法分析了共培养时间和菌液浓度对转化效率的影响;同时,测定了胚性细胞团对潮霉素敏感性。结果表明,适宜的共培养时间为3天,适宜的菌液浓度为OD600=0.4～0.6。潮霉素的致死剂量为15mg/L。使用大约1g鲜重的胚性细胞团,经过转化和选择培养,获得53块抗性愈伤组织,经诱导获得7个体细胞胚。GUS检测和PCR鉴定证实了gusA基因已经整合到橡胶树基因组中。本研究为根癌农杆菌介导的橡胶树胚性悬浮细胞遗传转化体系建立奠定了基础。

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来源
《中国农学通报》 |2012年第31期|15-20|共6页
作者
于波; 吴华玲; 黄天带; 戴雪梅;
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作者单位

中国热带农业科学院橡胶研究所/农业部橡胶树生物学重点开放实验室/省部共建国家重点实验室培育基地-海南省热带作物栽培生理学重点实验室;

广东省农业科学院茶叶研究所;

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正文语种 chi
中图分类热带、亚热带作物;
关键词
橡胶树; 根癌农杆菌; 遗传转化; 胚性悬浮细胞;

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