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运用基因芯片技术研究孕妇TORCH感染

         

摘要

本文利用DNA引物和探针设计软件DNAC lub和Prim er 5.0,根据从Genbank中查得的巨细胞病毒(HCMV169)、单纯疱疹病毒(HSV-Ⅰ,Ⅱ)、风疹病毒(RV)和弓形虫(TOX)基因序列分别设计16只寡核苷酸探针,长度30bp左右,合成后用简易手动点样仪M icroCaster按4×4矩阵点在氨基化玻片上,制成基因芯片;将被检测致病微生物DNA和质粒载体DNA用同一种内切酶切割、连接成“杂种”DNA,再利用载体上的通用引物进行PCR扩增和荧光染料标记扩增产物,并将该产物与DNA芯片杂交,用芯片扫描仪GeneTACTMUC4(Genom ic Solutions Inc)进行扫描,利用随机提供的软件GeneTAC IntegratorM icroarray Analysis Software Version3.30进行数据处理和分析。结果用该种方法制备的基因芯片可同时检测5种致病微生物,将用荧光定量PCR检测的阳性标本用基因芯片检测结果基本一致。

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