靶向性肿瘤相关抗原TAG-72的scFv-CD28融合基因的真核表达载体的构建

徐宏勇; 徐立; 李开宗; 窦科峰; 付由池; 刘彦仿

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目的　构建含抗肿瘤相关抗原TAG 72单链抗体及CD2 8胞内区及跨膜区融合基因的哺乳细胞表达载体 ,为制备消化道肿瘤靶向性嵌合锚定T细胞 ,并探讨其对消化道肿瘤的杀伤活性。方法　应用PCR法 ,将抗TAG 72单链抗体 (singlechainvariablefragment ,scFv)克隆入哺乳细胞表达载体pcDNA3 .0 ,在 5′端及 3′端分别引入相应酶切位点 ;用RT PCR法从正常人外周血T细胞克隆CD2 8胞内区及跨膜区的cDNA ,然后将其克隆于scFv的下游 ,并在 5′端及 3′端引入相应的酶切位点。结果　抗TAG 72scFvcDNA片段为 72 9bp ,与已知的序列相符 ;CD2 8胞内区及跨膜区的cDNA片段为 2 40bp ,与Genebank公布的序列一致。重组的表达载体经酶切琼脂糖电泳测序加以证实。结论　完成了抗肿瘤相关抗原TAG 72scFv及CD2 8胞内区及跨膜区融合基因scFv CD2 8 pcDNA3 .0的构建 ,为制备消化道肿瘤靶向性嵌合锚定T细胞奠定了实验基础。

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来源
《中国普外基础与临床杂志》 |2002年第6期|398-401|共4页
作者
徐宏勇; 徐立; 李开宗; 窦科峰; 付由池; 刘彦仿;
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作者单位

第四军医大学西京医院肝胆外科;

第四军医大学西京医院消化病研究所;

第四军医大学病理学教研室;

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原文格式 PDF
正文语种 chi
中图分类消化系肿瘤;
关键词
真核表达载体; 单链抗体; 共刺激信号; CD28分子; 肿瘤相关抗原; TAG-72抗原; 胃肠道肿瘤; T细胞;

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