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芥蓝RAPD反应体系的建立

         

摘要

利用改良的CTAB方法从芥蓝叶片中提取高质量的DNA。在参考一般RAPD分析反应程序的基础上,经过优化试验,确定适合芥蓝PCR扩增体系(总体积25μL)为:25mmol/LMgCl22.0μL、10×PCR Buffer2.5μL、2.5mmol/LdNTPs2.0μL、5U/μLTaq酶0.25μL、5μmol/L引物1.2μL、模板DNA25ng、灭菌双蒸水12.25 μL。PCR扩增程序为:94 ℃预变性5 min,94℃变性1 min,36 ℃退火1 min,72 ℃延伸2 min,40个循环,72 ℃延伸10 min。

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