转基因白桦外源基因的多重PCR快速检测

詹亚光; 苏涛; 韩梅; 孙冬

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转基因白桦外源基因的多重PCR快速检测

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摘要

根据转化的载体序列上T-DNA中的目的基因bt,选择性筛选标记基因nptⅡ和报告基因gus设计三对特异性引物,PCR产物片断大小分别为247bp、449bp、668bp,应用多重PCR(muti-plex-PCR)的方法同步检测18株转基因白桦中三个基因的整合状况;用阳性对照为模板,对单重PCR(simplex-PCR)和多重PCR的各项指标进行比较。结果表明多重PCR检测多个外源基因在敏感性方面与单重PCR相比并没有减弱,而且略有提高;对18株样品的多重PCR同步检测无假阳性出现,结果准确,同时在操作中具有减少污染,缩短时间和节约成本等优点。因此,在对转基因白桦的外源基因的定期检测中,多重PCR是一种非常有效而便捷的方法,可以为转基因的拷贝数,T-DNA旁侧序列特征等转基因整合特性方面的研究提供数据。

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来源
《植物研究》 |2006年第4期|480-485|共6页
作者
詹亚光; 苏涛; 韩梅; 孙冬;
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作者单位

东北林业大学生命科学学院;

东北林业大学森林植物生态学教育部重点实验室;

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正文语种 chi
中图分类分子遗传学;各种树的病虫害及其防治;
关键词
白桦; 外源基因; T-DNA; 多重PCR;

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