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利用农杆菌介导法获得转ipt基因半夏植株

         

摘要

以贵州珍珠半夏Pinellia ternate(Thunb.)Breit为材料,采用根癌农杆菌介导法,探索了影响半夏遗传转化效率的主要因子。结果表明,卡那霉素的最佳筛选浓度是100mg/L,侵染时间、共培养时间、乙酰丁香酮浓度对转化频率都有一定的影响。其中侵染时间为20min,共培养时间为3d,乙酰丁香酮的浓度控制在60~100mg/L时可以有效提高遗传转化效率。在此基础上辅以超声波处理5min,可以有效提高叶柄转化的瞬时表达率。对抗性转化植株进行Gus染色和PCR检测,结果表明外源基因ipt已经整合到半夏基因组中。

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