猪ATF4基因真核超表达载体的构建及鉴定

陈超; 吴望军; 熊远著

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猪ATF4基因真核超表达载体的构建及鉴定

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克隆猪ATF4基因CDS,构建pcDNA3.1(+)-ATF4真核超表达载体,为下一步在细胞水平和个体水平研究该基因功能奠定基础。提取RNA,运用RT-PCR和巢式PCR技术扩增猪ATF4全部编码序列,克隆转化到pMD18-T载体中,测序验证后,酶切连接到pcDNA3.1(+)载体中,构建成pcDNA3.1(+)-ATF4真核超表达载体,对其进行酶切和测序鉴定并在细胞水平上进行表达量的鉴定。实验结果表明,在转染了pcDNA3.1(+)-ATF4载体的细胞中,ATF4 mRNA表达水平明显增加,成功构建了pcDNA3.1(+)-ATF4真核超表达载体,为进一步研究该基因的功能奠定了基础。

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来源
《中国农学通报》 |2011年第23期|6-11|共6页
作者
陈超; 吴望军; 熊远著;
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作者单位

华中农业大学农业部猪遗传育种重点开放实验室;

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原文格式 PDF
正文语种 chi
中图分类遗传;
关键词
猪; ATF4; 载体构建; 瞬时转染;

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