抑制新城疫病毒繁殖的九肽及其突变体基因的克隆与原核表达

谢俊秋; 张庆华; 张雪燕; 姚海燕; 韩跃武

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抑制新城疫病毒繁殖的九肽及其突变体基因的克隆与原核表达

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目的克隆并表达抑制新城疫病毒(NDV)繁殖的九肽(Nonapeptide)及其突变体基因。方法设计并合成Non-apeptide2串联体及其突变体基因,克隆于质粒pUC18,经酶切回收目的基因,与经相同酶切的表达载体pGEX-4T-1连接,转化大肠杆菌BL21(DE3),筛选阳性菌落,抽提质粒进行鉴定。IPTG诱导表达后,进行SDS-PAGE及Western blot鉴定。结果重组表达质粒经双酶切、PCR及测序鉴定,证明构建正确。阳性重组菌的诱导表达产物经SDS-PAGE分析,在相对分子质量约29000处可见一明显条带,与理论值相符。Nonapeptide 2及其突变体蛋白的表达量分别占菌体总蛋白的41%和37%。Western blot结果显示两种蛋白均具有良好的反应原性。结论已成功克隆并表达了抗NDV繁殖的Nonapeptide及其突变体基因。

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来源
《中国生物制品学杂志》 |2008年第8期|662-664|共4页
作者
谢俊秋; 张庆华; 张雪燕; 姚海燕; 韩跃武;
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作者单位

兰州大学基础医学院医学生物化学与分子生物学研究所;

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正文语种 chi
中图分类家畜病毒学;基因的表达;
关键词
新城疫病毒; 九肽; 突变体; 克隆; 原核表达;

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