新城疫病毒NP基因的克隆与原核表达研究

刘苏君; 高永安; 张陈量; 金俊杰; 涂宜强; 荀飞琼; 白宇

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新城疫病毒NP基因的克隆与原核表达研究

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参照GenBank新城疫病毒(NDV) LaSota株NP基因序列,设计并合成1对特异性引物.提取NDVLaSota株基因组RNA,利用RT-PCR方法扩增出NP基因片段,将其克隆至pBluscriptⅡKS(+/-)多克隆位点,经PCR检测、酶切及测序检测,结果表明成功克隆获得NP基因.再将NP基因克隆到原核表达载体pET-28a(+)中,构建重组表达质粒pET-28a-NDV-NP.经酶切、PCR鉴定后的阳性重组质粒转化感受态BL21(DE3),经IPTG诱导表达后,通过SDS-PAGE分析结果表明,获得该蛋白的高效表达,主要以可溶性形式存在.Western-blot分析表明重组蛋白具有良好的反应原性.

著录项

来源
《浙江畜牧兽医》 |2014年第4期|4-7|共4页
作者
刘苏君; 高永安; 张陈量; 金俊杰; 涂宜强; 荀飞琼; 白宇;
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作者单位

温州科技职业学院,浙江温州325006;

温州科技职业学院,浙江温州325006;

温州科技职业学院,浙江温州325006;

温州科技职业学院,浙江温州325006;

温州科技职业学院,浙江温州325006;

温州科技职业学院,浙江温州325006;

温州欧斯达康生物公司;

温州科技职业学院,浙江温州325006;

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正文语种 chi
中图分类家畜病毒学;
关键词
NP基因; 原核表达; 新城疫病毒;

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