人Leptin的基因克隆及其在大肠杆菌中的表达

赵跃然; 游力; 贾玉华; 高春义; 田志刚

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人Leptin的基因克隆及其在大肠杆菌中的表达

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用 RT- PCR自脂肪细胞 RNA扩增人瘦素 (leptin)基因的 c DNA片段 (约 50 0 bp)并克隆至克隆载体 p SK(+) ,获得重组质粒 p SK- OB,DNA序列分析显示获得的 Leptin基因和文献报道一致 .用限制酶 Eco R 和 Bam H 从 p SK- OB切下并插入原核表达载体 p BV2 2 0的相应限制酶位点 ,转化大肠杆菌 DH5α.转化菌株经 42℃诱导 ,SDS- PAGE检测和 Western印迹鉴定 ,获得高水平重组人瘦素的表达菌株 ,其表达量达菌体总蛋白的 30 %以上 .

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来源
《中国生物化学与分子生物学报》 |2000年第6期|742-745|共4页
作者
赵跃然; 游力; 贾玉华; 高春义; 田志刚;
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作者单位

山东省肿瘤生物治疗研究中心;

济南 250062;

山东医科大学附属医院外科;

济南 250012;

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原文格式 PDF
正文语种 chi
中图分类基因工程（遗传工程）;激素;
关键词
Leptin; 克隆; 序列分析; 表达; 大肠杆菌; 肽类激素;

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