首页> 中文期刊> 《生物工程学报》 >人Leptin基因在大肠杆菌中的高效表达、纯化及其生物学活性研究

人Leptin基因在大肠杆菌中的高效表达、纯化及其生物学活性研究

         

摘要

将人Leptin表达质粒pBV220-OB转化E.coliJM109,经热诱导获得了目的蛋白的表达.经SDSPAGE鉴定分析,表达产物以包涵体形式存在,目的蛋白表达量占菌体总蛋白的40%以上.通过包涵体分离,Sephacryl S200HR凝胶和DEAE52离子交换层析及Hypersil C18柱反相色谱纯化,获得纯度在95%以上,内毒素含量小于10EU/mg的高纯度的重组人Leptin.Western-blot鉴定表明,纯化表达产物能和抗Leptin抗体特异性结合;蛋白质N端15个氨基酸序列分析结果和预期的序列一致.纯化产物经复性处理,其分子中Cys96和Cys146形成二硫键.体内活性检测显示,纯化和复性的rh-Leptm明显抑制BALB/c小鼠的进食和体重增长,提示其具有明显的生物学活性.

著录项

  • 来源
    《生物工程学报》 |2001年第2期|175-178|共4页
  • 作者单位

    山东省肿瘤生物治疗研究中心,山东省医学科学院基础医学研究所;

    山东省肿瘤生物治疗研究中心,山东省医学科学院基础医学研究所;

    山东省肿瘤生物治疗研究中心,山东省医学科学院基础医学研究所;

    山东省肿瘤生物治疗研究中心,山东省医学科学院基础医学研究所;

    山东省肿瘤生物治疗研究中心,山东省医学科学院基础医学研究所;

    山东省肿瘤生物治疗研究中心,山东省医学科学院基础医学研究所;

    山东省肿瘤生物治疗研究中心,山东省医学科学院基础医学研究所;

    山东省肿瘤生物治疗研究中心,山东省医学科学院基础医学研究所;

    山东省肿瘤生物治疗研究中心,山东省医学科学院基础医学研究所;

  • 原文格式 PDF
  • 正文语种 chi
  • 中图分类 生物医学工程;
  • 关键词

    Leptin,基因表达,大肠杆菌,JM109,蛋白纯化;

相似文献

  • 中文文献
  • 外文文献
  • 专利
获取原文

客服邮箱:kefu@zhangqiaokeyan.com

京公网安备:11010802029741号 ICP备案号:京ICP备15016152号-6 六维联合信息科技 (北京) 有限公司©版权所有
  • 客服微信

  • 服务号