人酸性成纤维细胞生长因子基因在大肠杆菌中的高效表达及产物纯化、鉴定

李兴德; 屠重棋; 彭红卫; 袁淑兰; 吴凤锷

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用Ｈｉｎｄ Ⅲ和ＥｃｏＲⅠ双酶酶切经改造的ＰＵＣａＦＧＦ质粒，获得了人酸性成纤维细胞生长因子（ｈａＦＧＦ）基因，将该基因片段插入表达载体ｐｋｋ２２３３，筛选得到了重组质粒ｐｋｋｈａＦＧＦ。加ＩＰＴＧ诱导该质粒转化的大肠杆菌ＪＭ１０９表达，ｈａＦＧＦ在发酵液中的表达水平约８０ｍｇ／Ｌ。用肝素亲和层析的方法，获得了电泳纯ｈａＦＧＦ样品。纯化过程中ｈａＦＧＦ活力回收率为６５％。纯化ｈａＦＧＦ样品的比活性为ＥＤ５０４．６ｎｇ／ｍｌ，理化及生物活性分析与天然ｈａＦＧＦ对照品完全一致。

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来源
《四川大学学报：医学版》 |1999年第3期|249-252|共4页
作者
李兴德; 屠重棋; 彭红卫; 袁淑兰; 吴凤锷;
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作者单位

成都倍菲生物工程有限公司;

华西医科大学附属第一医院;

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原文格式 PDF
正文语种 chi
中图分类基因工程（遗传工程）;
关键词
haFGF; 基因克隆; 基因表达; 大肠杆菌;

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