LDR结合毛细管电泳技术用于检测母体血浆中胎儿父系DNA点突变的可行性研究

易萍; 李力; 郑英如; 颜耀华; 赵艳; 周元国; 陈竹钦

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目的：研究DNA连接酶检测反应（LDR）技术结合毛细管电泳用于检测母体血浆中胎儿父系DNA点突变的可行性。方法：将Cy5荧光标记的LDR引物稀释成0.1-500fmol,用毛细管电泳技术（CEQ8000型遗传分析仪）检测稀释引物;然后以β地中海贫血IVS-Ⅱ-654（C→T）突变为例,将含该突变不同浓度的扩增产物为LDR模板,用LDR技术特异地识别突变,其中LDR一侧引物用Cy5荧光标记,最后用毛细管电泳技术检测连接产物。结果：遗传分析仪检测Cy5荧光标记的LDR引物灵敏度至少达到0.1fmol;该分析仪能检测含0.1fmol IVS-Ⅱ-654（C→T）突变的扩增产物为模板的LDR产物,产物峰面积随模板浓度增加而增加,而且未检测到以1000fmol无IVS-Ⅱ-654（C→T）突变的扩增产物为模板的LDR产物。结论：PCR/LDR结合毛细管电泳技术用于检测低丰度基因点突变有很高的灵敏度,有望用于检测母体血浆中胎儿DNA点突变,从而可能大大拓展母体血浆中胎儿DNA在无创性产前诊断中的应用范围。

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来源
《现代妇产科进展》 |2009年第6期|401-406|共6页
作者
易萍; 李力; 郑英如; 颜耀华; 赵艳; 周元国; 陈竹钦;
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作者单位

第三军医大学大坪医院野战外科研究所妇产科;

第三军医大学大坪医院野战外科研究所分子生物学中心;

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正文语种 chi
中图分类妊娠诊断;
关键词
连接酶检测反应; 血浆DNA; 产前诊断; 点突变;

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