生物素化的HLA-A*2402-抗原肽复合物的制备

卢小玲; 吴雄文; 翁秀芳; 李青; 梁智辉; 龚非力

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目的制备生物素化的HLA-A*2402-抗原肽复合物。方法将原核高效表达的sHLA-A*2402-BSP融合蛋白及β2m和HLA-A*2402限制性抗原肽EB病毒BRLF1蛋白中的九肽NH2-TYPVLEEMF-COOH进行稀释、复性、折叠,形成HLA-A*2402-抗原肽复合物单体,并在BirA酶作用下进行生物素化,使生物素结合到HLA-A*2402-抗原肽复合物中H链C端的BSP序列上形成生物素化的sHLA-A*2402-抗原肽复合物单体。利用特异性单克隆克体(W6/32和兔抗人2β微球蛋白抗体)及链霉亲合素进行ELISA和Western blot,检测稀释复性和生物素化的折叠产物。结果折叠复合物中,主要含有HLA-A*2402-肽复合物单体及β2m两种成分,其中HLA-A*2402-肽复合物单体可生物素化。结论成功制备出生物素化的HLA-A*2402-抗原肽复合物单体,为进一步构建四聚体及制备人工抗原提呈细胞奠定了基础。

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来源
《免疫学杂志》 |2006年第1期|78-81|共4页
作者
卢小玲; 吴雄文; 翁秀芳; 李青; 梁智辉; 龚非力;
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作者单位

华中科技大学同济医学院免疫学系;

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正文语种 chi
中图分类免疫分子生物学（免疫化学）;
关键词
HLA—A＊2402-抗原肽复合物; 生物素化; BirA酶;

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