四环素阻遏-蛋白与热激因子融合转录激活子的构建

胡华刚; 张兴国; 裴华丽; 万群; 苏承刚; 李志友; 张凤清; 童超; 芮春梅

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四环素阻遏-蛋白与热激因子融合转录激活子的构建

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为构建一新型低毒且受四环素负调控的基因表达调控系统,克隆了大肠杆菌XL1-BLUE四环素阻遏蛋白基因TetR和拟南芥热激因子基因Athsf1a缺失片段AtHSFC157,将两基因融合获得TetR:AtHSFC157融合片段作为四环素调控系统转录激活子,将其克隆入表达载体pXNSC2020中,成功构建了四环素负调控系统p35SC157-Om35Sgus。采用冻融法将其导入根癌农杆菌EHA105中,并通过农杆菌介导烟草叶片瞬间表达,以组织化学法检测GUS基因表达活性;结果在不加四环素处理条件下组织化学法检测到很强的GUS活性,而在含有1mg/L四环素的培养基中培养却没有检测到GUS活性;结论表明该技术所构建的新型四环素调控系统具有典型的受四环素负调控功能。

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来源
《中国农学通报》 |2007年第3期|89-93|共5页
作者
胡华刚; 张兴国; 裴华丽; 万群; 苏承刚; 李志友; 张凤清; 童超; 芮春梅;
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作者单位

西南大学园艺园林学院;

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原文格式 PDF
正文语种 chi
中图分类 Q344.14;
关键词
四环素; 基因表达调控系统; 负调控系统; 瞬间表达;

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