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TORCH与优生:Ⅲ用聚合酶链反应结合地高辛分子杂交产前诊断弓形虫感染

         

摘要

根据本实验室筛选出的弓形虫(ZS2株)特异DNA克隆片段的部分顺序分析的数据,设计并合成特异的寡核苷酸引物对,建立多聚酶链反应(PCR)诊断弓形虫感染的方法。不同来源弓形虫株和阳性标本DNA的PCR产物经电泳检测,均出现特异的扩增片段。以地高辛标记的该PCR产物中弓形虫特异顺序的寡核苷酸为探针,对扩增产物进行斑点杂交分析,该探针能与阳性病例的扩增产物杂交,而不与阴性病例的扩增产物杂交。用PCR结合地高辛分子杂交方法对不良生育史孕妇进行产前诊断,34例外周血白细胞DNA检测,2例阳性,分别为出生水肿胎儿和死胎;76例羊水细胞DNA检测,3例阳性,其中2例出生为无脑儿;30例绒毛DNA检测,4例阳性,均为难免流产。PCR产物结合地高辛分子杂交方法可测出少至10fg(10-14g)的弓形虫DNA,本方法更加特异敏感。

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