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猪CuZnSOD基因片段的克隆及不同生长阶段猪肝脏CuZnSOD基因表达的差异

         

摘要

从体质量1、20、40、60、90kg左右的杜长大猪的肝脏组织中提取基因组RNA,RT—PCR扩增CuZnSOD基因,获得了1务255bp的片段,以pGEM—TEasyVector为载体,将该片段克隆到大肠杆菌(E.coli)中,筛选阳性克隆测定其序列,分析表明该片段与报道的猪CuZnSODcDNA部分序列同源性达到100%,编码85个氨基酸组成的多肽,是成熟肽的一部分。以CuZnSOD基因片段的克隆为基础,构建了优化的半定量RT—PCR法,以18SrRNA为内标,研究不同生长阶段猪肝脏组织中CuZnSOD基因mRNA表达的差异。结果显示,1kg左右猪肝脏组织中CuZn—SODmRNA表达水平较高,体质量1~20kg猪的肝脏组织中CuZnSOD基因表达量呈下降趋势,体质量40kg的猪又显著上升,到生长后期即体质量90kg左右,CuZnSOD基因表达量又急剧下降。

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