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分子马达Kif5B蛋白的真核表达及其对乙型脑炎病毒复制的影响

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摘要

为了研究驱动蛋白Kif5B对乙型脑炎病毒(JEV)复制的影响,根据GenBank数据库中猪Kif5B基因的mRNA序列,采用RT-PCR扩增Kif5B基因片段并连接到pCAGGS-Flag载体中,经双酶切鉴定结合基因测序结果,成功构建真核表达重组载体pFlag-Kif5B。间接免疫荧光试验(IFA)和蛋白印迹试验(Western blot)结果证实,pFlag-Kif5B在猪肾细胞-15(PK-15)和猪肺泡巨噬细胞3D4/21中成功表达。JEV感染成功转染pFlag-Kif5B的2种细胞后,实时荧光定量PCR(RT-qPCR)、Western blot和IFA证实Kif5B能够明显促进JEV的复制。结果表明:Kif5B真核表达质粒构建成功,且过表达的Kif5B蛋白显著促进JEV在PK-15和3D4/21细胞中的复制,为深入研究Kif5B蛋白促进JEV感染的分子机制提供了理论依据。

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来源
《畜牧与兽医》 |2022年第6期|108-112|共5页
作者
娄锦秀; 李晓晗; 程颜; 赵冰倩; 周斌;
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作者单位

南京农业大学动物医学院;

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原文格式 PDF
正文语种 chi
中图分类家畜微生物学（兽医病原微生物学）;
关键词
乙型脑炎病毒; Kif5B蛋白; 真核表达; 病毒复制;

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