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右美托咪定对肺癌A549细胞炎症、凋亡及化疗敏感性的研究

         

摘要

目的:探讨右美托咪定对肺癌A549细胞炎症、凋亡及化疗敏感性的影响.方法:设A549细胞组、5-氟尿嘧啶组(40.0μg/ml)、右美托咪定组(80.0μg/ml)及联合组(5-氟尿嘧啶40.0μg/ml+右美托咪定80.0μg/ml);上述各组细胞置于CO2培养箱(37℃、5%CO2、2%O2、93%N2).以上各组每孔设6个平行样,培养72 h.培养结束后,以酶联免疫吸附法测定A549细胞炎症因子白细胞介素2(IL-2)、白细胞介素6(IL-6)及肿瘤坏死因子α(TNF-α)蛋白水平,以噻唑蓝(MTT)法及结晶紫染色测定细胞活力及单克隆形成数目,采用流式细胞仪测定凋亡水平,采用Matrigel膜测定侵袭迁移水平,以实时荧光定量PCR(qRT-PCR)法及蛋白免疫印迹法测定核因子κB(NF-κB)、原癌基因(c-myc)mRNA和蛋白水平.结果:与A549细胞组比较,5-氟尿嘧啶组、右美托咪定组及联合组细胞IL-2、IL-6、TNF-α蛋白水平,吸光度,存活率,NF-κB,c-myc mRNA和蛋白表达水平明显降低,细胞克隆形成数目、穿膜数明显减少,凋亡率明显升高,差异均有统计学意义(P<0.05).与5-氟尿嘧啶组、右美托咪定组比较,联合组细胞IL-2、IL-6、TNF-α蛋白水平,吸光度,存活率,NF-κB,c-myc mRNA和蛋白表达水平明显降低,细胞克隆形成数目、穿膜数明显减少,凋亡率明显升高,差异均有统计学意义(P<0.05).结论:右美托咪定能抑制肺癌A549细胞炎症、增殖和侵袭,促进其凋亡,增加5-氟尿嘧啶对肺癌A549细胞的化疗作用;其机制与右美托咪定能增强5-氟尿嘧啶对A549细胞NF-κB、c-myc mRNA和蛋白表达的抑制作用有关.

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