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高效阴离子交换色谱-脉冲安培法分析嗜热链球菌胞外多糖的单糖组成

         

摘要

为建立稳定的以阴离子交换色谱分析嗜热链球菌胞外多糖单糖组成的方法,以淋洗液浓度为切入点,优化了梯度洗脱程序;同时,对比分析了不同方法除蛋白对多糖单糖组成分析的影响.优化后的色谱分析条件为:CarboPac PA20色谱柱(3 mm×150 mm),流速0.5 mL/min,0~20 min 使用 1.75 mmol/L NaOH 溶液洗脱中性糖和氨基糖,20~30 min使用1.75 mmol/L NaOH溶液结合50~200 mmol/L NaOAc溶液洗脱糖醛酸,30~40 min使用200 mmol/L NaOH溶液冲洗色谱柱,40~60 min重新平衡系统.基于上述方法,12种混合单糖标准可得到理想分离,各单糖质量浓度标准曲线的相关系数>0.99,检出限(S/N = 3)为2.5~21.1 μg/L,平均回收率在77.3%~118.5%.此外,样品预处理分析表明,最佳的胞外多糖除蛋白方法为三氯乙酸法.利用上述优化条件对不同嗜热链球菌产胞外多糖的单糖组成进行分析,结果表明,胞外多糖均由半乳糖胺、鼠李糖、葡糖胺、半乳糖、葡萄糖、甘露糖、半乳糖糖醛酸和葡萄糖醛酸组成.研究建立的色谱分离和胞外多糖预处理方法可为乳酸菌胞外多糖的单糖组成分析提供参考.

著录项

  • 来源
    《食品与发酵工业》 |2021年第15期|255-261|共7页
  • 作者单位

    上海理工大学医疗器械与食品学院 上海食品微生物工程技术研究中心 上海 200093;

    上海理工大学医疗器械与食品学院 上海食品微生物工程技术研究中心 上海 200093;

    上海理工大学医疗器械与食品学院 上海食品微生物工程技术研究中心 上海 200093;

    上海理工大学医疗器械与食品学院 上海食品微生物工程技术研究中心 上海 200093;

  • 原文格式 PDF
  • 正文语种 chi
  • 中图分类
  • 关键词

    嗜热链球菌; 胞外多糖; 脱蛋白; 高效阴离子交换色谱; 单糖组成;

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