基于内参系统的阪崎肠杆菌实时荧光定量PCR检测方法的建立

王金凤; 王建昌; 胡连霞; 孙晓霞; 陈志敏; 姜彦芬

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基于内参系统的阪崎肠杆菌实时荧光定量PCR检测方法的建立

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根据阪崎肠杆菌ompA靶基因设计特异性引物和探针,并加入内参(IAC),建立能够实时监控反应过程的荧光定量PCR检测方法.结果表明,该方法对阪崎肠杆菌基因组DNA的最低检测限为1 pg;对细菌的最低检测限为1×104 CFU;对含有靶基因质粒的最低检测限为103拷贝;Ct值与模板拷贝数均呈良好的线性关系(R2=0.999).人工污染试验结果表明,在初始菌量为10 CFU/25 g奶粉样品时,采用水洗加试剂盒法和水煮法提取DNA,阪崎肠杆菌均在增菌10 h时检出.研究结果为进一步优化和完善阪崎肠杆菌分子生物学方法的标准化提供了参考.

著录项

来源
《食品与机械》 |2016年第6期|68-72|共5页
作者
王金凤; 王建昌; 胡连霞; 孙晓霞; 陈志敏; 姜彦芬;
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作者单位

河北出入境检验检疫局检验检疫技术中心;

河北石家庄050051;

河北出入境检验检疫局检验检疫技术中心;

河北石家庄050051;

河北出入境检验检疫局检验检疫技术中心;

河北石家庄050051;

河北出入境检验检疫局检验检疫技术中心;

河北石家庄050051;

河北出入境检验检疫局检验检疫技术中心;

河北石家庄050051;

河北出入境检验检疫局检验检疫技术中心;

河北石家庄050051;

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正文语种 chi
中图分类
关键词
阪崎肠杆菌; ompA; 实时荧光定量PCR; 内参;

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