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慢病毒介导的靶向SNCG敲除对人结肠癌SW1116裸鼠结肠癌肝转移实验模型的影响

         

摘要

目的 研究慢病毒介导的γ突触核蛋白(SNCG)基因敲除对人结肠癌SW1116细胞在裸鼠结肠癌肝转移实验模型中的影响.方法 前期实验中,通过SNCG基因敲除并慢病毒转染,构建稳定表达的SNCG敲除实验组(RNAi组)、转染空质粒的空质粒对照组(NC组).复苏基因敲除实验组(RNAi组)、空质粒对照组(NC组)及空白对照组(CON组)的野生型SW1116细胞,保脾法建立裸鼠结肠癌肝转移模型,免疫组化染色、逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)、蛋白质免疫印迹(Western blot)检测SNCG基因的表达.结果 1)成功构建裸鼠结肠癌肝转移模型.2)与对照组比较,RNAi组裸鼠移植瘤生长缓慢,原位成瘤率及肝转移率均明显下降.3)免疫组化、RT-PCR及Western blot结果显示,RNAi组SNCGmRNA和蛋白表达均明显下降.结论 SNCG基因沉默后,裸鼠脾脏原位移植瘤及转移瘤的数量变少,体积变小.在体内,靶向SNCG敲除降低了原位移植瘤及肝脏转移瘤中SNCG基因的mRNA及蛋白表达,表明SNCG基因对结肠癌的增生、侵袭起积极推动作用.利用RNAi技术抑制SNCG基因的表达有望为结肠癌的基因治疗提供新靶点、新手段.

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