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重金属铅多克隆抗体的制备及纯化

         

摘要

制备重金属铅完全抗原,进而制备和纯化重金属铅的多克隆抗体.使用双功能螯合剂p-SCN-Bn-DTPA、Pb2+标准溶液和牛血清白蛋白(BSA)制备重金属铅的完全抗原Pb-DTPA-BSA;运用聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)方法判断完全抗原Pb-DTPA-BSA是否合成成功,并应用紫外分光光度计测定免疫抗原Pb-DTPA-BSA的浓度;取0.5 mg免疫抗原Pb-DTPA-BSA加入弗氏佐剂乳化后免疫家兔,制备抗重金属铅多克隆抗体,并运用凝胶柱层析法纯化抗重金属铅多克隆抗体,SDS-PAGE方法判定抗重金属铅多克隆抗体的纯化结果.SDS-PAGE结果显示成功制备重金属铅的完全抗原Pb-DTPA-BSA,其浓度为3.4mg/mL;应用免疫抗原Pb-DTPA-BSA免疫家兔,成功制备抗重金属铅多克隆抗体:应用凝胶柱层析法纯化获得高纯度抗重金属铅多克隆抗体.成功制备重金属铅的完全抗原Pb-DTPA-BSA,并成功制备和纯化抗重金属铅的多克隆抗体.

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