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NKG2D 配体介导雷帕霉素对自然杀伤细胞的间接抑制作用

         
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目的 探讨雷帕霉素对高表达三磷酸腺苷(ATP)结合转运蛋白G超家族成员2(ABCG2)人耐药鼻咽癌细胞CNE2/DDP(简写为ABCGHigh2 CNE2/DDP)NKG2D配体表达及其对NK(Natural killer NK)细胞杀伤活性的影响.方法 利用免疫磁珠技术分离ABCGHigh2 CNE2/DDP细胞及NK细胞,流式细胞技术检测分离后细胞纯度及经雷帕霉素处理前后靶细胞NKG2D配体表达率,LDH释放测定法检测经雷帕霉素处理前后ABCGHigh2 CNE2/DDP细胞对NK细胞的杀伤敏感性.结果 ABCGHigh2 CNE2/DDP细胞分离后ABCG2表达率为(91.40±2.32)%,分选后NK细胞CD3-CD16+ CD56+ 细胞的纯度达90%以上,经雷帕霉素处理之后靶细胞MICA、MICB、ULBP1、ULBP2、ULBP3表达率,由药物处理之前的(2.92±0.33)%、(4.27±0.33)%、(5.80±O.62)%、(11.10 ±3.15)%、(7.75 ±1.14)%分别下降到(1.50 ±0.36)%、(2.36±0.72)%、(2.24±0.12)%、(5.06 ±1.16)%、(3.94 ±0.78)%.在效靶比为10:1、20:1时,NK细胞对雷帕霉素处理前后ABCGHigh2 CNF2/DDP细胞的杀伤率由处理前的(15.32±1.34)%、(27.26±2.02)%下降到(10.82 ±0.73)%、(22.72±2.03)%,处理前后杀伤率差异有显著性(F=71.40 P=0.000).结论 雷帕霉素通过诱导肿瘤细胞低表达NKG2D配体(MICA/B、ULBP1-3),间接抑制了NK细胞的杀伤活性.

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