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pcDNA3.1-Bcl-2真核表达载体构建

         

摘要

目的 克隆大鼠Bcl-2基因(B cell lymphoma)全长cDNA,构建含大鼠Bcl-2基因的重组真核表达质粒.方法 采用RT-PCR的方法 从大鼠脾脏组织中扩增全长Bcl-2cDNA,将扩增产物克隆至pMD18-T栽体,测序证实后,再克隆至真核表达载体pcDNA3.1(+),构建了pcDNA3.1-Bcl-2重组质粒.结果 RT-PCR获得长度为720 bp的阳性产物,经T栽体和pcDNA3.1(+)真核表达栽体克隆、酶切鉴定及序列分析后,证实真核表迭质粒pcDNA3.1-Bcl-2构建成功.结论 成功克隆了Bcl-2基因,并构建了pcDNA3.1-Bcl-2重组质粒,为进一步研究Bcl-2基因的功能及应用Bcl-2进行基因治疗奠定基础.

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