STI571 诱导K562细胞耐药机制的实验研究

张嵩; 杜庆锋; 刘晓力; 李荣; 樊伟; 朱红倩; 王瑜

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STI571 诱导K562细胞耐药机制的实验研究

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目的体外建立对STI571耐药的K562细胞系(简写为K562-R),并对其耐药机制进行初步分析.方法用药物浓度逐步递增的方法培养野生型K562细胞(简写为K562-W).绘制K562-R生长曲线,MTT法检测STI571、阿霉素(adriamycin,ADR)和三尖杉酯碱(harringtonine,HT)时K562-R的细胞毒作用,Hoechst33342染色检测STI571对K562-R诱导凋亡作用.流式细胞术检测K562-R的MDR-1表达情况;基因测序检测K562-R的Abl激酶ATP结合区点突变情况;间期荧光原位杂交(interphasal fluorescence in situ hybridization,Ⅰ-FISH)检测Bcr/Abl融合基因扩增情况.结果生长曲线绘制结果表明K562-R在0.5 μmol/L的STI571环境中可呈指数增长;MTT法检测STI571对K562-W和K562-R的半数抑制浓度(50% inhibiting concentration,IC50)分别为(1.64±0.13)μmol/L和(3.32±0.05)μmol/L,K562-R的耐药倍数为(2.04±0.16)倍,而ADR和HT对两种细胞毒性作用均呈剂量依赖性反应,耐药前后差异无显著性(P值分别为0.472和0.108);Hoechst 33342细胞凋亡试验表明STI571对K562-W诱导凋亡作用呈剂量依赖性,对K562-R作用减弱.流式细胞术检测K562-R和K562-W的MDR-1表达率分别为2.68%和1.39%(P＜0.001),基因测序表明两种细胞Abl激酶ATP结合区序列完全一致;Ⅰ-FISH检测初步观察K562-R的Ber/Abl融合信号拷贝数增多(P＜0.001).结论体外成功建立STI571耐药的K562细胞系,其耐药机制可能与Bcr/Abl融合基因扩增有关.

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来源
《广东医学》 |2008年第3期|364-366|共3页
作者
张嵩; 杜庆锋; 刘晓力; 李荣; 樊伟; 朱红倩; 王瑜;
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作者单位

南方医科大学南方医院血液科,广州,510515;

南方医科大学南方医院临床医学教育中心,广州,510515;

南方医科大学南方医院血液科,广州,510515;

南方医科大学南方医院血液科,广州,510515;

南方医科大学南方医院血液科,广州,510515;

南方医科大学南方医院血液科,广州,510515;

南方医科大学南方医院血液科,广州,510515;

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正文语种 chi
中图分类基础医学;
关键词
STI571; K562; 耐药;

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