抗人B型钠尿肽噬菌体抗体库的构建及噬菌体抗体的筛选

刘世明; 李民友; 钟赟; 吴楚财

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抗人B型钠尿肽噬菌体抗体库的构建及噬菌体抗体的筛选

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目的利用噬菌体表面展示技术构建抗人B型钠尿肽(BNP)的单链噬菌体抗体库及筛选抗人BNP的特异性单链噬菌体抗体.方法从正常人外周血淋巴细胞提取总RNA,扩增抗体重链和轻链可变区基因片段,加入连接子并构建单链噬菌体抗体库.用人BNP包被的免疫管筛选噬菌体.经过4轮的富集筛选,从最后一轮噬菌体感染的大肠杆菌TG1中随机挑选20个单菌落,用ELISA方法测定阳性噬菌体抗体,并将这些噬菌体抗体与BSA进行交叉反应试验.结果 ELISA测试表明,20个单菌落中有8株吸光度较高而且交叉反应较弱的阳性噬菌体抗体,DNA测序符合预期目标.结论成功构建人B型钠尿肽噬菌体抗体库,并筛选出表达人源性BNP单克隆抗体噬菌体,为下一步抗BNP单链抗体的表达纯化及临床应用打下了基础.

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来源
《广东医学》 |2006年第12期|1783-1785|共3页
作者
刘世明; 李民友; 钟赟; 吴楚财;
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作者单位

广州医学院第二附属医院,广州,510260;

广东省广州市济源生物科技有限公司,510630;

广州医学院第二附属医院,广州,510260;

广州医学院第二附属医院,广州,510260;

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原文格式 PDF
正文语种 chi
中图分类基础医学;
关键词
B型钠尿肽; 噬菌体展示; 抗体库; 单链抗体;

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