表达人KIAA1173基因的鼻咽癌6-10B细胞模型的建立

张三泉; 蒋会勇; 韩西群; 胡海; 张进华; 姚开泰; 赵彤

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目的建立表达人KIAA1173基因的鼻咽癌6-10B细胞模型,为探究人KIAA1173基因在鼻咽癌发病机制中的作用奠定实验基础.方法从新鲜肌肉组织中提取总RNA,采取逆转录PCR(RT-PCR)得到人KIAA1173基因cDNA,纯化PCR产物,与真核表达载体pcDNA3.1(+)连接,转化,铺极,筛选阳性克隆,酶切鉴定并进行序列测定.将重组质粒pcDNA3.1(+)-KIAA1173和空载体利用阳离子脂质体介导转入鼻咽癌6-10B细胞,经G418筛选阳性克隆.用RT-PCR、原位杂交及免疫细胞化学方法检测KIAA1173基因在6-10B细胞中的稳定表达情况.以空白质粒转染组作为对照.结果重组质粒pcDNA3.1(+)-KIAA1173经酶切和DNA测序分析显示与GenBank所公布的相应序列相符,插入方向正确,阅读框架完整.转染KIAA1173基因的6-10B细胞阳性克隆在mRNA和蛋白水平证实,转染细胞内有该基因高表达,表明细胞可表达人KIAA1173基因.结论成功获得了人KIAA1173基因全长cDNA的基因克隆,将该基因导入鼻咽癌6-10B细胞后,获得生物学活性稳定的KIAA1173基因高表达的细胞模型.

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来源
《广东医学》 |2005年第12期|1629-1631|共3页
作者
张三泉; 蒋会勇; 韩西群; 胡海; 张进华; 姚开泰; 赵彤;
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作者单位

南方医科大学南方医院病理科,广州,510515;

南方医科大学南方医院病理科,广州,510515;

南方医科大学南方医院病理科,广州,510515;

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南方医科大学南方医院病理科,广州,510515;

南方医科大学南方医院病理科,广州,510515;

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正文语种 chi
中图分类肿瘤学;
关键词
KIAA1173基因; 鼻咽肿瘤; 转染; 细胞模型;

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