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木材蓝变生物控制菌康氏木霉胞外几丁质酶的纯化及特性

         

摘要

本研究以木材蓝变生物控制菌康氏木霉(6111-ET)为供试菌株进行胞外几丁质酶纯化和特性的研究.将液态PDA培养基中的康氏木霉(Trichoderma koningii)置于恒温播床(200 r/min,28℃)培养10天.培养滤液经过硫酸铵分级沉淀、Q-HP强阴离子交换柱层析、Phenyl-Sepharose疏水层析、CM-Sepharose弱阳离子交换柱层析、Phenyl-Sepharose疏水柱层析后得到凝胶电泳(SDS-PAGE)谱带单一的几丁质酶,其分子量为36kDa,最适温度为40℃,最适pH为4.0.多种金属阳离子对该酶具有影响,Ca2+、Fe2+对酶活力有比较明显的激活作用,其中Fe2+的作用最强;K+、Na+、CU2+有明显的抑制作用.

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