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MiR-132调控BAD表达对卒中大鼠神经细胞凋亡的影响

         

摘要

目的:探讨miR-132对卒中大鼠神经细胞凋亡的影响及其作用机制.方法:30只SPF级雄性Wistar大鼠,应用随机数字法随机分为三组,分别为假手术组、模型组以及AgomiR-132处理组.模型组以及AgomiR-132处理组大鼠构建MCAO动物模型.应用HE染色实验方法检测miR-132对MCAO大鼠脑组织形态学的影响.应用Tunel实验方法检测miR-132对MCAO大鼠脑组织神经细胞凋亡的影响.在SH-SY5Y细胞系中,应用流式细胞术及Western blot实验方法检测miR-132表达含量对OGD模型诱导的神经细胞凋亡的影响.基于生物信息方法预测以及荧光酶素报告基团实验方法检测miR-132的直接作用靶点.构建Bad过表达的SH-SY5Y细胞系,应用流式细胞术实验方法检测miR-132的凋亡抑制作用是否与其抑制BAD有关.结果:HE染色结果指出,与模型+NC组大鼠脑组织相比,AgomiR-132显著改善了卒中大鼠脑组织的形态学.TUNEL实验结果指出,AgomiR-132显著降低了卒中大鼠脑组织脑组织中凋亡细胞的数量.流式细胞术及Western blot实验结果指出,miR-132 mimic显著降低了OGD诱导的细胞凋亡且显著降低了Bax/Bcl2蛋白水平.荧光酶素报告基团实验结果指出,miR-132通过结合在BAD mRNA的3'UTR区域从而负向调控BAD的表达.在Bad过表达细胞系中,miR-132的抗凋亡能力显著降低,指出miR-132通过靶向BAD抑制OGD模型诱导的神经细胞凋亡.

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